Тег Архивы: Антитела

Наша лаборатория исследует редкое и изнурительное заболевание, опосредованное аутоантителами, называемое pemphigus vulgaris, при котором иммунная система генерирует антитела против десмоглеинов, которые являются белками, ответственными за удержание клеток кожи вместе.

Наша иммунная система - убийственная машина. Он состоит из различных типов специализированных клеток и белков, которые функционируют для уничтожения захватчиков и «несамых» или мутированных «я» белков, таких как те, которые происходят от вируса78_RH image_optes, бактерий и раковых клеток. В аутоиммунных заболеваниях, таких как болезни P / P, этот механизм пошатнулся, и иммунная система фактически нападает на собственные клетки.

У пациентов с P / P антитела, продуцируемые В-клетками иммунной системы, блокируют функцию белков desmoglein Dsg1 и Dsg3, которые, как известно, важны для связывания вместе кератиноцитов кожи и слизистых оболочек, но неизвестно, как генерируются мошеннические антитела по их иммунной системе, как они избегают механизмов контроля качества, которые только позволяют В-клеткам с несамостоящими свойствами выживать, и почему пациенты с Р / Р настолько редки.

Новое исследование под руководством доктора Эйми Пейн в Отделе дерматологии в Университете Пенсильвании (Nature Communications, http://www.nature.com/ncomms/2014/140619/ncomms5167/abs/ncomms5167.html) помогает нам начать понять почему.

В предыдущей работе д-р Пейн и его коллеги идентифицировали антитела, которые распознают Dsg1 и Dsg3 (так называемые антитела против Dsg1 и анти-Dsg3), а также идентифицировали области тех антител, которые важны для способности этих антител быть патогенными - то есть распознавать их цели Dsg в pemphigus vulgaris (PV) и pemphigus foliaceus (PF) и нарушить их функцию. Чтобы расширить эту работу и лучше понять, как возникают аутоантитела PV, доктор Пейн и его коллеги провели аналогичный анализ PV пациентов.

PV пациенты могут присутствовать как слизистые доминанты, где затронуты только слизистые оболочки или как слизистые, влияющие как на слизистые оболочки, так и на кожу. Почти у всех пациентов, страдающих слизистой оболочкой, у пациентов с аутоантителами анти-Dsg3, у пациентов с слизистой оболочкой есть аутоантитела против Dsg3, а также аутоантитела против Dsg1. Поскольку считается, что Dsg1 и Dsg3 могут компенсировать функцию друг друга, наличие функционального Dsg1 в коже в присутствии аутоантител к анти-Dsg3 может объяснить, почему у пациентов с преобладанием слизистых оболочек нет кожных повреждений.

Авторы сначала выделили полный репертуар антител у четырех разных пациентов с необработанным PV, все с мукокутальным заболеванием. Они изолировали и охарактеризовали их в многоступенчатом процессе, что в конечном итоге позволило им определить аминокислотные композиции (путем клонирования и методов секвенирования ДНК) PV-антител пациента. Это привело к назначению шести уникальных антител от пациента 1 и пяти дополнительных уникальных антител от трех других пациентов с PV.

В целом, усилия по секвенированию выявили уникальные тяжелые цепи 21 среди четырех пациентов.

Все антитела 11 могут связываться с Dsg3, и это опосредовано через домен (называемый EC1) в Dsg3, который, как известно, имеет важное значение для его адгезионных взаимодействий, что указывает на то, что связывание с аутоантителом против Dsg3 с Dsg3 приводит к прямому блоку функции Dsg3 в кератиноцитах (и последующее разбухание кожи).

Любопытно, что не все антитела, которые авторы идентифицировали связанным Dsg3, могут вызвать образование пузырей при добавлении к образцам тканей кожи человека; VH1-46-содержащие антитела. Они определили, что эти различия в функциональных эффектах обусловлены неспособностью непатогенных антител связываться с функциональными доменами Dsg3.

Еще более любопытно, что авторы обнаружили, что у всех четырех пациентов было по крайней мере одно PV-антитело, которое состояло из идентичного вариабельного региона, называемого VH1-46. Они также обнаружили очень мало изменений в аминокислотной последовательности VH1-46 в антителах пациентов по сравнению с известной последовательностью VH1-46, которая также существует у незатронутых пациентов (считается «диким типом» или зародышевой последовательностью).

Как отмечают авторы, это образец, характерный для последовательности соматически мутированных антител, что означает, что очень мало изменений было создано во время развития В-клеток (каждый со своим собственным единственным антителом, которое он делает, см. Рис.).

Они провели несколько дополнительных экспериментов, чтобы определить способность этих изменений аминокислот влиять на связывание с Dsg3. Они заключают, что аутоантитела VH1-46 в PV генерируются при развитии В-клеток и требуют очень небольшой мутации, чтобы стать патогенной. Это говорит о том, что они появляются на ранней стадии развития болезни и объясняют их распространенность у всех пациентов, прошедших тестирование здесь.

Эти аутоантитела не могут быть наиболее распространенными позже (во время полномасштабной болезни), но они могут дать ключ к тому, почему и как возникает пемфигус. Способность этих аутоантител избегать механизмов контроля качества при играх при развитии В-клеток, вероятно, обусловлена ​​наличием низких уровней антигена Dsg3, который бы отличал эти антитела как «самоподобные» антитела и, следовательно, способность механизма маркировать клетки и их мошеннические аутоантитела к уничтожению.

Эти данные привели авторов к предположению, что пять патогенных (вызывающих заболевание) mAb VH1-46 anti-Dsg3, которые они идентифицировали в этом исследовании, относятся к самым ранним аутоантителам, сформированным у пациентов с PV, вызванным только тем, насколько просто они генерируют из последовательностей зародышевой линии. Они также определяют механизм того, как создаются эти аутоантитела, и что самое главное, как их пропускают механизмы контроля качества - все события с низкой вероятностью, которые, вероятно, объясняют редкость PV.

Будет ли Зрнчик, генеральный директор IPPF, вместе с бывшим членом правления д-ром Саханой Вьяс, стартовал в выходные во второй половине дня в пятницу. Будет представлен обзор предстоящих выходных и подчеркнута важность участия сообщества в МФПР. Волонтерство, сбор средств и участие в программах - все, что каждый может оказать поддержку.

Доктор Анимеш Синха (Университет Буффало) начал свою сессию на пемфигусе. Он рассказал о клинических особенностях заболевания и о том, как формируются специфические антитела, которые атакуют клей в ваших клетках кожи, а также то, как это выглядит, когда клетки выходят из организма под микроскопом. Доктор Синха говорил о генетических маркерах для пемфигуса и о том, как часто случаи встречаются чаще в определенных группах людей, чем другие. Он дал недавно диагностированным пациентам действительно хорошую картину того, как он выглядит, чтобы жить с болезнью. В заключение доктор Синха призвал пациентов и их родственников пожертвовать кровь для дальнейшего исследования причин возникновения пемфигуса и создания лучшего лечения.

Д-р Амит Шах (Университет Буффало), представленный в реестре IPPF, и данные, данные нам. Пемфигус и пемфигоид - редкие заболевания, поэтому наличие реестра помогает лучше понять болезни во всем мире. Основной целью исследования является исследование различных характеристик пациентов, зарегистрированных. В реестре показано преобладание по признаку пола, средний возраст и расовые / генетические нарушения. Данные реестра говорят о том, что больше женщин поставили диагноз, а средний возраст начала - 40-60 лет. Данные показывают, что у женщин активность слизистых больше, чем у мужчин, тогда как мужчины более подвержены повреждениям кожи. Эти результаты помогут исследователям и врачам расширить свои знания о болезни.

Доктор Рацаке Ахмед (Бостонская волчанка) округлил вечер с обзором пемфигоида. Он объяснил, как пемфигоид отличается от пемфигуса местоположением и видом пузырей. Он сказал, что пемфигоид слизистой оболочки (ММР) и рубцовый пемфигоид (СР) обычно поражают людей среднего возраста (и старше). Он объяснил различия между буллезным пемфигоидом (BP) и MMP с окулярной MMP, также может быть затронута трахея. Д-р Ахмед подчеркнул, что ранняя диагностика и лечение необходимы, особенно с ММП (люди могут потерять зрение или дыхательную способность из-за рубцевания).

Сахана и Уилл открыли субботнюю сессию с теплым приемом, за которым последовали президент Совета IPPF д-р Бадри Ренгараджан. Бадри начал с важности IPPF для людей с P / P - недавно диагностированных, во вспышке, в ремиссии и повсюду между ними. Он рассказал аудитории, что Фонд предоставляет все свои ресурсы пациентам, опекунам, членам семьи и медицинским работникам бесплатно. Зная это, не менее важно, чтобы Фонд продолжал оказывать помощь другим на долгие годы. Бадри упомянул четыре способа, которыми Фонд помогает пациентам: улучшение качества жизни; сокращение времени диагностики; понимание и преодоление вспышек; и поддержка новых диагностических методов и исследований. Просил аудиторию обратиться к Фонду, когда им нужна помощь, и поддержать Фонд для увеличения наших услуг.

Д-р Сергей Грандо (Калифорнийский университет - Ирвин) обсудил преднизон (что известно как кортикостероиды) и как работают стероиды. Он упомянул о побочных эффектах стероидов и влияет на пациентов. Он предположил, что процесс лечения должен быть коллективным. Доктор Грандо также говорил об адъювантных препаратах (для снижения дозы стероидов) и использовании IVIg и иммунодепрессантов для снижения активности заболевания.

Доктор Раззак Ахмед вернулся на сцену, чтобы поговорить о побочных эффектах лечения. Он прокомментировал, как экстремальные случаи P / P могут закончиться в ожоговых единицах - не соответствующее лечение. Доктор Ахмед предположил, что лечащим врачам пациента следует сообщить, какие лекарства принимаются, поэтому лечение дополнительных проблем тщательно координируется. Он рассказал о побочных эффектах преднизона и о важности отслеживания их обмена с вашим врачом. Он обсуждал побочные эффекты иммунодепрессантов (таких как Imuran®, CellCept® и Cytoxan® и их связь с раком), IVIG, Rituxan® и другие методы лечения. В заключение доктор Ахмед подчеркнул открытое общение со всеми врачами пациента, чтобы обеспечить наилучшую помощь.

Знаете ли вы, что 13 миллионы литров плазмы собираются каждый год, и антитела, извлеченные из этой плазмы, делают ИВГГ? Д-р Майкл Ригас (KabaFusion) объяснил это, и больше в его разговоре. Он рассказал аудитории, как производится препарат, откуда он исходит, и почему он стоит того, что он делает. Затем доктор Ригас объяснил, как он вводится пациенту, и какие пациенты должны ожидать после инфузии. Он сказал, что ИВГГ, как лечение P / P, не одобрено УЛХ США. Он закрыл, сказав, что есть много факторов, которые следует учитывать, прежде чем пациент получит ИВГГ и поговорит с вашим врачом, если у вас есть вопросы.

Доктор Грант Ангальт (Университет Джона Хопкинса) представил физиологию PV. Он объяснил, как и почему клетки отделяются друг от друга. Он сказал, что многие назначенные в настоящее время противовоспалительные препараты ничего не делают для ингибирования продуцирования антител. Он представил резюме Imuran®, CellCept®, IVIG и ритуксимаба и как они работают на P / P. Он обнаружил, что ритуксимаб был очень успешным в лечении PV без побочных эффектов, обычно встречающихся в онкологических препаратах. Доктор Ангальт описал, как ритуксимаб разрушает созревающие В-клетки в течение 6-9 месяцев и как результаты нескольких исследований показали успех ритуксимаба на ранних стадиях PV.

Виктория Карлан (член совета IPPF и основатель канадского фонда Pemphigus & Pemphigoid) рассказала о личных сетях поддержки. Она открыла свое личное путешествие по PV, объяснив важность ее сети поддержки, и как она использовала ее, чтобы успешно жить с P / P. Это позволило ей найти ответы и найти поддержку. Она объяснила, как сети поддержки могут наращивать физические, умственные и эмоциональные силы.

Менеджер программы осведомленности IPPF Кейт Франц рассказала о Кампании по повышению осведомленности IPPF. Повышение осведомленности в медицинском сообществе важно для сокращения времени диагностики для пациентов. Она сказала, что мы все можем помочь с осознанием наших побежденных способов. Один из способов - стать Послом по информированию в вашем сообществе. Послы по информированию отправятся в свою общину для распространения информации P / P. Другие ca пишут в газеты, говорят на профессиональных собраниях и привлекают других в вашем сообществе. Она подчеркнула важность распространения информации через социальные сети, чтобы помочь создать «бренд», который другие могут относиться к IPPF и P / P.

Одна из учителей-пациентов в области осведомленности IPPF, Ребекка Стронг, обсудила дополнительные способы распространения информации. Люди могут писать своим федеральным, государственным и местным представителям, которые поощряют их к участию в улучшении вашего здоровья и поддержке законодательства, которое приносит пользу всем нам. Будьте вашим собственным адвокатом и спросите тех, кого вы знаете, которые могли бы помочь вам защищать вас. Там действительно правда для Силы Единого.

Доктор Фирдаус Дхабхар (Стэнфордский университет) рассказал о стрессе и аутоиммунитете. Доктор Дхабхар обсудил биологические реакции, которые происходят со стрессом, не всегда отрицательные, но могут быть положительными. Краткосрочные острые стрессы (такие как хирургия, вакцинация и т. Д.) Могут усилить положительный иммунный ответ. Однако хронические, долгосрочные стрессы оказывают негативное воздействие на организм. С долгосрочными стрессами цель состоит в том, чтобы свести к минимуму их последствия с лучшим сном, питанием, упражнениями, успокаивающими действиями или чем-то, что сработает для вас.

В воскресенье пациенты заняли центральное место для обсуждения в группе пациентов. В числе наших экспертов были старший тренер Peer Health Peer Health Career Марк Джейл (MMP / OCP), Бекки Стронг (PV), тренер по психотерапии Мей Линг Мур (PV), член Совета IPPF Ребекка Олинг (PV) и Джанет Сегал (PV). Вопросы охватывали личную передовую практику, касающуюся побочных эффектов и рекомендаций по продуктам.

В этом успешном сегменте была проведена 90-минутная телеконференция в мае 2014, где люди 80 регистрировались с людьми 40 по вызову в любой момент времени.

После группы пациентов в IPPF было проведено несколько семинаров. Эти более мелкие целенаправленные сеансы были посвящены таким темам, как различные методы стрессового стресса, диета и питание, уход за полостью рта, глазные проблемы, IVIG и вопросы возмещения. Была также успешная фокус-группа, сосредоточенная на Кампании по повышению осведомленности.

Как только семинары закончились, участники собрались в главной комнате для вопросов и ответов с некоторыми из динамиков выходных. Вопросы задавали, обсуждали и отвечали эксперты из разных специальностей.

Уилл и Бадри напомнили всем, что все мы можем быть вовлечены в то, чтобы убедиться, что недавно диагностированные пациенты получают необходимую им помощь, участвуя в программах IPPF и жертвуя по нашему делу. И во время своих заключительных замечаний Уилл объявил, что конференция пациентов с ХNUMX будет в Нью-Йорке, и информация будет поступать по мере ее поступления.

Предыстория: Pemphigus vulgaris (PV) и pemphigus foliaceus (PF) являются потенциально фатальными пузырчатыми заболеваниями, вызванными аутоантителами, нацеленными на белки адгезии десмоглеина. Предыдущие исследования показали преобладание IgG4> IgG1 антител против десмогулина в пемфигусе; однако ни один из исследований не исследовал уровни сывороточного IgG4 в пемфигусе. IgG4 индуцируется хронической антигенной стимуляцией, которая может возникать при персистирующей кожной вспышке и потенциально повышать общий IgG4 сыворотки по сравнению с другими подклассами IgG у пациентов с пемфигусом. Цели: Основная цель исследования состояла в том, чтобы количественно определить общие и десмогулинспецифические подклассы IgG у пациентов с пемфигусом. Методы. Подклассы IgG и специфичные для десмогулина IgG1 и IgG4 были количественно определены в PV, PF и сопоставленных по возрасту нормальных сыворотках с использованием ELISA подкласса. Эффективность распада IgG4 при блокировании патогенности PV IgG определяли с использованием анализа диссоциации кератиноцитов. Результаты. Десмогуинспецифические антитела включали медиану 7.1% и 4.2% от общего IgG4 у пациентов с PV и PF, с 8-fold и 4-кратным обогащением IgG4 по сравнению с IgG1. Общий сывороточный IgG4, но не другие подклассы IgG, был обогащен пациентами с PV и PF по сравнению с контрольными по возрасту (p = 0.004 и p = 0.005, соответственно). IgG4 истощение PV SERA уменьшало патогенность в анализе диссоциации кератиноцитов и показало, что аффинно очищенный IgG4 является более патогенным, чем другие фракции IgG сыворотки. Выводы: специфические аутоантитела к десмогуину значительно обогащены IgG4, что может объяснить обогащение общего IgG4 сыворотки у некоторых пациентов с пемфигусом. При преимущественном нацеливании на аутоиммунные, а не на полезные иммунные антитела, терапия, ориентированная на IgG4, может предлагать более безопасные варианты лечения пемфигуса.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22803659?dopt=Abstract

Задний план: Pemphigus vulgaris (PV) и pemphigus foliaceus (PF) являются потенциально смертельными заболеваниями пузырей, вызванными аутоантителами, нацеленными на белки адгезии desmoglein. Предыдущие исследования показали преобладание IgG4> IgG1 антител против десмогулина в пемфигусе; однако ни один из исследований не исследовал уровни сывороточного IgG4 в пемфигусе. IgG4 индуцируется хронической антигенной стимуляцией, которая может возникать при персистирующей кожной вспышке и потенциально повышать общий IgG4 сыворотки по сравнению с другими подклассами IgG у пациентов с пемфигусом.

Цели: Основная цель исследования заключалась в том, чтобы количественно определить общие и дезмогин-специфические подклассы IgG у пациентов с пемфигусом.

Методы: Подклассы IgG и специфичные для десмогулина IgG1 и IgG4 были количественно определены в PV, PF и сопоставленных по возрасту сыворотках с использованием ELISA подкласса. Эффективность распада IgG4 при блокировании патогенности PV IgG определяли с использованием анализа диссоциации кератиноцитов.

Результаты: Десмулин-специфические антитела включали медиану 7.1% и 4.2% от общего IgG4 у пациентов с PV и PF, с 8-fold и 4-кратным обогащением IgG4 по сравнению с IgG1. Общий сывороточный IgG4, но не другие подклассы IgG, был обогащен пациентами с PV и PF по сравнению с контрольными по возрасту (p = 0.004 и p = 0.005, соответственно). IgG4 истощение PV SERA уменьшало патогенность в анализе диссоциации кератиноцитов и показало, что аффинно очищенный IgG4 является более патогенным, чем другие фракции IgG сыворотки.

Выводы: Десмулин-специфические аутоантитела значительно обогащены IgG4, что может объяснить обогащение общего IgG4 сыворотки у некоторых пациентов с пемфигусом. При преимущественном нацеливании на аутоиммунные, а не на полезные иммунные антитела, терапия, ориентированная на IgG4, может предлагать более безопасные варианты лечения пемфигуса.

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1365-2133.2012.11144.x/abstract